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　　Super ECL Boom kit（特超敏化学发光检测试剂盒）

　　品货号:C3003 产品价格规格：10 mL, 100 mL

　　价格：

　　C3003-10ml     Super ECL Star（特超敏化学发光检测试剂盒）100ml￥140 元/盒

　　C3003-100ml   Super ECL Star（特超敏化学发光检测试剂盒）100ml￥862元/盒

　　产品内容：

　　储存条件

　   4℃密封避光保存，短期可放置于室温。有效期见外包装。

　　产品介绍

　　Super ECL Boom kit 最高灵敏度底物是一款具有超高灵敏度的增强型化学发光（ECL）底物，可通过辣根过氧化物酶（HRP）实现极低表达或高价值蛋白的免疫印迹检测。Super ECL Star 特超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP 的抗体及其关联的抗原。

　　Super ECL Boom kit （特超敏）特点：

　　具有极高灵敏度和高信噪比，使用适当的一抗和二抗时， 可在硝化纤维膜或 PVDF 膜上检测极低表达或高价值蛋白的条带；通过胶片或成像系统曝光，易于捕获图像；

　　10 ng-0.2 μg/mL 一抗（ 或 1 mg/mL 的稀释 1:5,000-1: 100,000）

　　2 ng-10 ng/mL 二抗（ 或 1 mg/mL 的稀释 1:100,000-1: 500,000）

　　使用方法

　　执行常规 SDS-PAGE 电泳、转膜和Western Blot 步骤， 0.01-0.2 μg/mL 一抗室温孵育 1 h 或 4℃过夜，洗膜后，2-10 ng/mL 二抗孵育 30-60 min。Western Blot 最后一次洗膜时，新鲜配制发光工作液：分别取等体积的溶液 A 和 B，混匀。

　　注：建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。成像仪检测：用镊子取出 PVDF 膜置于成像仪检测板上， 含蛋白面朝上，沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液（0.125 mL 发光工作液/cm2 膜）滴加在 PVDF 膜上，使发光液完全覆盖 PVDF 膜，室温孵育 3-5 min，参考仪器说明书进行检测。

　　压片检测：用镊子取出 PVDF 膜置于保鲜膜上，含蛋白面朝上，沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液（0.125 mL 发光工作液/cm2 膜）滴加在 PVDF 膜上，使发光液完全覆盖 PVDF 膜，室温孵育 3-5 min，弃发光工作液，用保鲜膜包好，将膜固定于片夹内，含蛋白面向上。暗室内压片 1 min，立即显影，根据结果再调整压片时间。或分别压片 0.5、1、3、5 min，然后一起显影观察结果。

　　注意事项

　　1.步骤 1~4 可在日光灯下操作，但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低，移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。

　　2.长时间曝光或蛋白过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系，曝光不足则条带模糊。

　　3.如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用 ECL 发光和曝光。

　　4.由于特超敏发光液极其灵敏，强烈推荐大多数进口抗体稀释浓度为一抗 1:5000~1:100,000，二抗 1:100,000~ 1: 500,000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带。

　　5.某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜。使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。

　　7.NaN3 能抑制HRP 活性，回收第二抗体应避免使用 NaN3， 如必需使用勿超过 0.01%。

产品说明书下载：C3003Super ECL Boom kit（特超敏化学发光检测试剂盒）.pdf