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Super ECL kit(灵敏化学发光检测试剂盒)

发布时间:2019-01-09 00:51:54人气:158

Super ECL kit(灵敏化学发光检测试剂盒)


产 品 说 明 书

 

  Super ECL kit(灵敏化学发光检测试剂盒)

  货号:C3001  产品规格: 100 mL, 500 mL

  产品内容:

规格

组分

100mL

500mL

A

50 mL

250 mL

B

50 mL

250 mL

  价格:

  C3001-100ml    Super ECL Prime(灵敏化学发光检测试剂盒)100ml  ¥405 元/盒

  C3001-500ml    Super ECL Prime(灵敏化学发光检测试剂盒)500ml  ¥1253 元/盒

  储存条件

  4℃密封避光保存,有效期见外包装。

  产品介绍

  Super ECL Kit免疫印迹底物是用于增强型化学发光(ECL)的入门级过氧化物酶底物,性能可靠,但成本更低, 性价比极高。

  Super ECL Kit免疫印迹底物适用于辣根过氧化物酶(HRP)的检测,该底物采用了常用的鲁米诺和过氧化物酶底物配方,无需对检测条件或孵育方案进行优化.

  Super ECL Kit(灵敏)特点:

  1. 简单易用;

  2. 灵敏度更高:可检测较低表达的蛋白;

  3. 更经济:具有高品质和高性能。

  使用方法

  1. 执行常规 SDS-PAGE 电泳、转膜和 Western Blot 步骤后, 0.25-1 μg/mL 一抗室温孵育 1 h 或 4℃过夜,洗膜后,0.1-0.2 μg/mL 二抗孵育 30-60 min。

  2. Western Blot 最后一次洗膜时,新鲜配制发光工作液:分别取等体积的溶液 A 和B,混匀。

  注:建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度会有降低。

  3. 成像仪检测:用镊子取出 PVDF 膜置于成像仪检测板上, 含蛋白面朝上,沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液(0.125 mL 发光工作液/cm2 膜)滴加在 PVDF 膜上,使发光液完全覆盖 PVDF 膜,室温孵育 3-5 min,参考仪器说明书进行检测。

  4. 压片检测:用镊子取出 PVDF 膜置于保鲜膜上,含蛋白面朝上,沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液(0.125 mL 发光工作液/cm2 膜)滴加在 PVDF 膜上,使发光液完全覆盖 PVDF 膜,室温孵育 3-5 min,弃发光工作液,用保鲜膜包好,将膜固定于片夹内,含蛋白面向上。暗室内压片 1 min,立即显影,根据结果再调整压片时间。或分别压片 0.5、1、3、5 min,然后一起显影观察结果。

  注意事项

  1. 发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能有降低,操作时注意避光。戴手套可以避免在膜上留下手印。

  2. 长时间曝光会加深背景;蛋白过量,会使条带强弱变化失去线性关系;曝光不足,则条带模糊或较浅。

  3. 如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 曝光。

  4. 由于发光液极其灵敏,强烈推荐大多数进口抗体稀释浓度为一抗 1:1000~1:4000,二抗 1:5000~1:10000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带。

  5. 某些保鲜膜可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。

  6. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。

  7. NaN3 会抑制HRP 活性,回收二抗应避免使用 NaN3,如必需使用勿超过 0.01%。



产品说明书下载:C3001Super ECL kit(灵敏化学发光检测试剂盒).pdf



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