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Super ECL Plus kit(超敏化学发光检测试剂盒)

发布时间:2019-01-09 00:53:09人气:186

Super ECL Plus kit(超敏化学发光检测试剂盒)

  产 品 说 明 书

  Super ECL Plus kit(超敏化学发光检测试剂盒)价格:

  货号:C3002 产品规格:100 mL, 500 mL

  价格:

  C3002-100ml   Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)100ml¥460 元/盒

  C3002-500ml   Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)500ml¥1620 元/盒

  储存条件

  4℃密封避光保存,有效期见外包装。

  产品介绍

  Super ECL Plus Kit免疫印迹底物是增强型化学发光(ECL) 过氧化物酶的底物,可帮助用户在免疫印迹分析过程中实现低表达或高价值蛋白的检测。

  Super ECL Plus Kit 底物可为使用辣根过氧化物酶(HRP)偶联物的免疫印迹实验提供明亮的信号,对低表达或高价值蛋白检测灵敏度很高。

  Super ECL Plus kit(超敏)特点:

  1. 具有极高灵敏度:检测硝化纤维素膜或 PVDF 膜上低表达或高价值的蛋白条带;

  2. 长信号持续时间:条件优化的情况下,经底物孵育的印迹条带能够持续输出 6 至 8 h 的可检测光信号;

  3. 价格经济:配方经过优化,适用于浓度极低的抗体检测。

  0.2-1 μg/mL 一抗(或 1 mg/mL 的稀释 1:1,000-1:5,000)

  10-50 ng/mL 二抗(或 1 mg/mL 的稀释 1:20,000-1:100,000)

  使用方法

  执行常规 SDS-PAGE 电泳、转膜和 Western Blot 步骤,

  1.0-0.2 μg/mL 一抗室温孵育 1 h 或 4℃过夜,洗膜后,10-50 ng/mL 二抗孵育 30-60 min。

  2. Western Blot 最后一次洗膜时,新鲜配制发光工作液:分别取等体积的溶液 A 和 B,混匀。注:建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

  3.成像仪检测:用镊子取出 PVDF 膜置于成像仪检测板上, 含蛋白面朝上,沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液

  (0.125 mL 发光工作液/cm2 膜)滴加在 PVDF 膜上,使发光液完全覆盖 PVDF 膜,室温孵育 3-5 min,参考仪器说明书进行检测。

  4. 压片检测:用镊子取出 PVDF 膜置于保鲜膜上,含蛋白面朝上,沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液(0.125 mL 发光工作液/cm2 膜)滴加在 PVDF 膜上,使发光液完全覆盖 PVDF 膜,室温孵育 3-5 min,弃发光工作液,用保鲜膜包好,将膜固定于片夹内,含蛋白面向上。暗室内压片 1 min,立即显影,根据结果再调整压片时间。或分别压片 0.5、1、3、5 min,然后一起显影观察结果。

       注意事项

  1. 发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能有降低,操作时注意避光。戴手套可以避免在膜上留下手印。

  2. 长时间曝光会加深背景;蛋白过量,会使条带强弱变化失去线性关系;曝光不足,则条带模糊或较浅。

  3. 如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 曝光。

  4. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。

  5. NaN3 会抑制HRP 活性,回收二抗应避免使用 NaN3,如必需使用勿超过 0.01%。



产品说明书下载:
C3002Super ECL Plus kit(超敏化学发光检测试剂盒).pdf




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