产品名称：SYBR Green qPCR Supermix

CAT：A1001 规格：100T，500T

价格：

　　A1001-100TSYBR Green qPCR Supermix    1ml￥180元/包

　　A1001-500TSYBR Green qPCR Supermix    5ml￥712元/包

Supermix 包含 SYBR Green dye， dNTP， PCR buffer，热启动 Taq 聚合酶，参比染料。

 储存条件

-20℃避光保存，开封后可放置于 4℃，有效期见外包装。

 产品介绍

SYBR Green I 是一种结合于所有 dsDNA 双螺旋小沟区域的具有绿色激发光的染料。SYBR Green I 与dsDNA 结合后荧光信号会增强 800-1000 倍，是一种常用的 qPCR 荧光染料。具有高灵敏度，信噪比高等优势，可应用于基因表达差异分析，基因芯片等。

 SYBR Green qPCR Supermix 为一款应用于 qPCR 基因表达分析的明星产品，本产品在试剂稳定性、特异性、高 GC 含量序列扩增能力及抗抑制能力等方面都有了很大提升，更关键的是优化了产品的使用步骤。

该试剂中含有特殊的 ROX 参比染料， 适用于所有qPCR 仪器，无需在不同的仪器上调整 ROX 的浓度，只需在配制反应体系中加入引物和模板即可进行扩增。

 使用方法

1. 取出 2×  SYBR Green qPCR Supermix，引物，模板，RNase-free 水，恢复至室温，轻轻涡旋，充分混匀。

2. 按如下体系制备反应混合液：

 注 1. 模板浓度：DNA 模板的添加量通常在 100 ng 以下。因不同种类的 DNA 模板中含有的靶基因的拷贝数不同，必要时可进行梯度稀释， 确定合适的 DNA 模板添加量。gDNA 做模板时，通常 1-10 ng 即可。cDNA 作为模板时的添加量不要超过 PCR 反应体系总体积的 10%。注 2. PCR 引物的终浓度通常为 0.4 μM，可以得到较好的结果，反应性能较差时，可以在 0.2-1 μM 范围内调整引物浓度。

3. 轻轻涡旋混匀反应混合液，转移固定体积至 PCR 管。

4. 您可以根据扩增模板的性质和仪器的功能，选择以下两个程序之一进行实验。

A. 两步快速扩增法

这个程序适用于大多数引物 Tm 为 60℃的扩增，熔解曲线遵循您所用仪器提供的标准流程执行。

B. 三步扩增法

这个程序适用于扩增温度比退火温度高的实验。例如，如果扩增片段有相对较长的引物，容易产生非特异性的扩增，在

更高的温度下进行延伸可以降低非特异性扩增。熔解曲线遵循您所用仪器提供的标准流程执行。

 注：延伸时间请根据使用的实时定量 PCR 仪所需要的数据采集最短时间限制自行调整。

5. 将待检样品，放入 PCR 仪，运行 PCR 程序。

6. 分析实验数据。

1. 退火温度：退火温度应根据引物 Tm 值设定，通常是 50

-65℃为佳。不过，引物 Tm 值（和扩增温度）应尽可能接近 60℃（但仍在 50 - 60℃范围内），减少退火和变性温度之间的差距，加快 PCR 扩增速度。

2. 退火时间：退火时间应控制在 5-20s 范围内，退火时间延长可增强扩增效率，退火时间缩短可降低非特异性扩增， 可根据实验情况进行适当调整。

3. 为保证产品效果，应尽量避免反复冻融。

说明书下载：HX-A1001SYBR Green qPCR Supermix.pdf