产 品 说 明 书
Super ECL Boom kit(特超敏化学发光检测试剂盒)
品货号:C3003 产品价格规格:10 mL, 100 mL
价格:
C3003-10ml Super ECL Star(特超敏化学发光检测试剂盒)100ml¥140 元/盒
C3003-100ml Super ECL Star(特超敏化学发光检测试剂盒)100ml¥862元/盒
产品内容:
储存条件
4℃密封避光保存,短期可放置于室温。有效期见外包装。
产品介绍
Super ECL Boom kit 最高灵敏度底物是一款具有超高灵敏度的增强型化学发光(ECL)底物,可通过辣根过氧化物酶(HRP)实现极低表达或高价值蛋白的免疫印迹检测。Super ECL Star 特超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP 的抗体及其关联的抗原。
Super ECL Boom kit (特超敏)特点:
具有极高灵敏度和高信噪比,使用适当的一抗和二抗时, 可在硝化纤维膜或 PVDF 膜上检测极低表达或高价值蛋白的条带;通过胶片或成像系统曝光,易于捕获图像;
10 ng-0.2 μg/mL 一抗( 或 1 mg/mL 的稀释 1:5,000-1: 100,000)
2 ng-10 ng/mL 二抗( 或 1 mg/mL 的稀释 1:100,000-1: 500,000)
使用方法
执行常规 SDS-PAGE 电泳、转膜和Western Blot 步骤, 0.01-0.2 μg/mL 一抗室温孵育 1 h 或 4℃过夜,洗膜后,2-10 ng/mL 二抗孵育 30-60 min。Western Blot 最后一次洗膜时,新鲜配制发光工作液:分别取等体积的溶液 A 和 B,混匀。
注:建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。成像仪检测:用镊子取出 PVDF 膜置于成像仪检测板上, 含蛋白面朝上,沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液(0.125 mL 发光工作液/cm2 膜)滴加在 PVDF 膜上,使发光液完全覆盖 PVDF 膜,室温孵育 3-5 min,参考仪器说明书进行检测。
压片检测:用镊子取出 PVDF 膜置于保鲜膜上,含蛋白面朝上,沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液(0.125 mL 发光工作液/cm2 膜)滴加在 PVDF 膜上,使发光液完全覆盖 PVDF 膜,室温孵育 3-5 min,弃发光工作液,用保鲜膜包好,将膜固定于片夹内,含蛋白面向上。暗室内压片 1 min,立即显影,根据结果再调整压片时间。或分别压片 0.5、1、3、5 min,然后一起显影观察结果。
注意事项
1.步骤 1~4 可在日光灯下操作,但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2.长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系,曝光不足则条带模糊。
3.如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 发光和曝光。
4.由于特超敏发光液极其灵敏,强烈推荐大多数进口抗体稀释浓度为一抗 1:5000~1:100,000,二抗 1:100,000~ 1: 500,000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带。
5.某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。
7.NaN3 能抑制HRP 活性,回收第二抗体应避免使用 NaN3, 如必需使用勿超过 0.01%。
产品说明书下载:C3003Super ECL Boom kit(特超敏化学发光检测试剂盒).pdf